货号: | SDK-1K |
供应商: | Lumigen |
数量: | 1 |
规格: | 1k |
Lumigen_SPARCL鲁米根SPARCL (Lumigen SPARCL)
~~~无洗涤均相免疫分析法鲁米根专利产品 SPARCL (空间邻近化学发光分析法) 是一种通过检测闪光型空间邻近化学发光信号的均相化学发光新技术。该技术无需固相包被和洗涤,检测可在30分钟完成。 SPARCL不但能够使大规模筛选微型化,并且具有很宽的动态检测范围和高的灵敏度。由于无固相包被, SPARCL液相动力学消除了因检测试剂附着于固体表面而导致的各种差异。因为检测在均相液体内进行, 无洗涤, 接近体内自然状态, SPARCL检测结果更快,更准确。 SPARCL技术能够自动化,应用领域广泛,包括
ELISA,蛋白质-蛋白质、蛋白-核酸之间的相互作用,以及分子间结合反应。使用SPARCL这一突破性技术取代传统技术或衍生出新的分析方法,将可引领超大规模筛选技术的发展。 ~~~SPARCL特点:
节省时间,整个反应只有一步
抗原抗体结合孵育,无需分离或洗涤,即时产生闪光型化学发光信号, 30分钟内完成检测。
使用更少的试剂、少量的样本和更少的仪器,不需微孔板/珠包被操作,不需自动清洗站或其他昂贵的检测设备。
适用于在液相或固相模式下, 检测多种不同类型的的待测分析物。
因无洗涤过程, 所以无需处理洗液; 传统ELISA每孔产生13倍体积的废液,SPARCL每孔产生的废液仅为1倍体积。 ~~~只需四个步骤, 30 分钟完成, 无固相包被, 无洗涤
加入样本以及标记的抗体;孵育5-30分钟;加入本底消除试剂;注入触发剂,立即读取闪光发光信号。 ~~SPARCL与传统ELISA检测比较
基于微孔板或
磁珠包被的传统ELISA包含两个抗原/抗体结合过程,即待测分析物先后与捕获抗体和酶标记的检测抗体相结合,每个结合反应需要30-60分钟,并且每个结合过程以后, 必需洗板,每次洗板需要重复2-3次,以去除未结合的或者结合不牢固的非特异性物质。在SPARCL技术中,待测分析物与两个特异性抗体的结合是同时发生的,未结合的物质并不会对检测结果产生影响,省去传统ELISA过程中的第二次抗原/抗体结合反应, 省去全部的洗涤过程。· SPARCL无需固相包被在固相
载体上包被捕获抗体是ELISA技术的一个必须步骤,待测分析物通过与吸附在固相载体上的捕获抗体相结合与基质分开,而SPARCL技术不需抗体固相包被过程。· SPARCL是闪光型化学发光传统的ELISA技术需要酶催化底物,30分钟左右检测吸光度。SPARCL是闪光型化学发光,在加入触发剂后立即产生发光信号,光强度与样本中待测物分析物的量成正比。 传统ELISA检测流程 (双抗夹心法)
SPARCL检测流程 (双抗夹心法)
~~SPARCL基本原理SPARCL是Spatial Proximity Analyte Reagent Capture Luminescence的缩写, 中文直译为空间邻近分析物试剂捕获发光, 简称为空间邻近化学发光分析法。 基本原理是: 通过待测分析物同时与辣根过氧化物酶(HRP)和化学发光底物 (Acridan, 9,10-二氢吖啶) 分别标记的抗体特异结合, 使得辣根过氧化物酶(HRP)与9,10-二氢吖啶 (Acridan)在空间上得以相互接近, 在加入含有过氧化氢 (H2O2)的触发剂和增强剂后, 即刻产生闪光型化学发光。该发光可应用发光光度计检测, 光的强度与样本中待测物分析物的量成正比。
SPARCL(空间邻近化学发光分析法)的反应机理示意图 ~~SPARCL 应用可用于多种基于两个标记物之间通过直接或间接的相互作用, 使得标记酶HRP与9,10-二氢吖啶在空间上得以接近的检测, 例如:
- ELISA:夹心法、直接法、间接法 、竞争法
- 蛋白-蛋白、蛋白-抗体、蛋白-DNA、DNA-DNA相互作用
- 大规模筛选与相关受体结合的小分子配体
- 表面受体之间或受体亚基之间互相作
~~SPARCL 检测模式
SPARCL可采用固相或非固相反应模式。当使用固相载体时, 9,10-二氢吖啶和特定的捕获抗体被连接到固相载体如
微球或微孔板上; 当不采用固相载体时,捕获抗体直接与9,10-二氢吖啶结合。液相模式不需要微孔板或微球包被,由于没有固/液界面的存在,使反应在更接近自然生物环境状态下进行,提高了反应动力学而缩短孵育时间。
夹心法----液相检测
固相检测
竞争分析法----液相检测 温馨提示:不可用于临床治疗。